Тест-эритроциты готовы к применению и предназначены исключительно для диагностики in vitro. Эритроциты крови человека получены от одного донора, упакованы по 10 ml, суспензия 0,8 % (+/- 0,1%). Рекомендуется хранить при температуре от 2 до 8 ⁰С.

Внимание! Биологические материалы, которые использовались для изготовления стандартных эритроцитов, предварительно обследованы при помощи лицензированных реагентов на наличие HIV, HCV и Hbs антигена. Абсолютной гарантии отсутствия инфекции не даёт ни один из современных диагностических методов. Соблюдайте осторожность при работе с биологическими препаратами, являющимися потенциальным источником инфекции.

Дополнительные реагенты

ID-карты ”AB0+Rev.Gr”, “NaCl/Enzyme test”, “Rev.Gr.+Antibody Screening”, которые содержат 6 микропробирок, заполненных нейтральным гелем.

Прочие материалы

• ID-рабочий столик;


• ID-наконечники;


• Пробирки для суспензирования эритроцитов;


• ID-диспенсер;


• ID-пипетка Fp-1, FP-2 или FP-3;


• ID-центрифуга со скоростью вращения на 6, 12 или 24 карты и фиксированным временем.

Образцы для проведения тестов

Перед тем, как произвести забор крови, специальной подготовки пациента проводить не требуется. Забор образца крови происходит посредством венопункции. Для того чтобы результаты были наиболее достоверными, лучше применять свежезаготовленную кровь. Забор крови целесообразно проводить на  гепарин, цитрат, СРD-А или ЭДТА.

В тех случаях, когда требуется использование сыворотки, а не плазмы, сыворотка очищается при помощи центрифугирования в течение 10 минут на скорости 1500 об./минуту. В результате очищения удаляются остатки фибрина, из-за присутствия которых результаты полученной реакции могут быть недостоверными.

Порядок приготовления образцов крови

а) Суспензия эритроцитов для проведения аутоконтроля

Суспензия эритроцитов 0,8 % приготавливается в Растворе 2 в следующем порядке:

• раствор перед употреблением согревается до достижения комнатной температуры;


• в чистую пробирку внести 1 ml Раствора 2;


• добавить эритроциты расфасованные по 10 млк;


• осторожно перемешать;


• использовать суспензию можно сразу после приготовления.

б) Сыворотка или плазма

Если пробы не предназначены для немедленного тестирования, их необходимо хранить при температуре 2 - 8 ⁰С на протяжении 48 часов после сепарации, после чего при температуре -20 ⁰С.

Осуществление контроля

Для того чтобы подтвердить достоверность  полученных результатов, необходимо параллельно проводить исследование плазмы (сыворотки), группа AB0 которой известна заранее.

Порядок проведения исследования

Эритроциты и исследуемые образцы перед употреблением должны согреться до комнатной температуры. Флакон со стандартными эритроцитами крови человека необходимо аккуратно встряхнуть до получения однородной взвеси. Для получения достоверных результатов при проведении исследования запрещено применять ID-карты с повреждённой защитной фольгой, пузырьками в геле или с признаками высыхания.

Исследование проводится в определенной последовательности:

• берется одна из перечисленных выше ID-карт;


• проверяется правильность нанесения маркировки, на которой указаны фамилия пациента и его номер;


• удаляется алюминиевая фольга;


• в соответствующие микропробирки вносится взвесь  стандартных эритроцитов Аи В (по 50 мкл);


• содержимое микропробирки инкубируется при комнатной температуре в течение 10 минут;


• в течение 10 минут в ID-центрифуге проводится центрифугирование;


• читаются и интерпретируются полученные результаты.

Принцип интерпретации полученных результатов

При получении положительного результата эритроцитарные агглютинаты распределяются в толще геля или образуют линию на его поверхности. При получении отрицательного результата на дне микропробирки образуется плотный осадок.

Реакции определения групп крови

Для подтверждения наличия или отсутствия холодовых аутоантител проводится аутоконтроль.

Каждый раз, когда имеется противоречие в полученных результатах определения группы крови обратным и прямым методом, должен осуществляться аутоконтроль. 

Регулярно контролировать результаты, полученные при помощи тест-эритроцитов, можно с использованием контрольного дополнительного набора DiaMed-ID.

Существующие ограничения

1. Слишком светлые или чрезмерно концентрированные суспензии эритроцитов могут стать причиной получения искаженного результата. 


2. В ходе проведения исследования необходимо применять только рекомендованное фирмой оборудование, которое систематически проходит проверки в соответствии с процедурами GLP.


3. Бактериальная либо другая контаминация используемых материалов может стать причиной для получения ложноотрицательных или ложноположительных результатов.


4. Искажение результатов реакции может возникать при использовании других суспензионных растворов для эритроцитов, нежели ID-Diluents.


5. Остатки во взвеси стандартных эритроцитов фибрина в состоянии захватывать неагглютинированные эритроциты. После центрифугирования эти остатки представляет собой тонкую розовую линию, образовавшуюся на поверхности геля, в то время как большинство эритроцитов будет иметь место локализации на дне микропробирки.

Статья написана на базе материалов сайта www.isoseroclon.ru.